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聚合酶鏈式反應(yīng)（PolymeraseChainReaction,PCR）是分子生物學(xué)中基礎(chǔ)且廣泛應(yīng)用的技術(shù)之一，用于特異性擴增目標DNA片段。盡管PCR儀和試劑是核心要素，但實驗的順利進行同樣高度依賴一系列專用耗材。這些pcr耗材不僅影響反應(yīng)效率和特異性，還直接關(guān)系到實驗的重復(fù)性...
脂轉(zhuǎn)染是一種基于脂質(zhì)的轉(zhuǎn)染該技術(shù)屬于生化方法，還包括聚合物、DEAE葡聚糖和磷酸鈣。脂轉(zhuǎn)染原理是將核酸與陽離子脂質(zhì)制劑結(jié)合起來。由此產(chǎn)生的分子復(fù)合物（稱為脂質(zhì)復(fù)合物）隨后被細胞吸收。脂轉(zhuǎn)染的主要優(yōu)點是效率高、能夠在多種細胞類型中轉(zhuǎn)染所有類型的核酸、易于使用、重現(xiàn)性好和低毒性。此外，該方法適用于所有轉(zhuǎn)染應(yīng)用（瞬時轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定轉(zhuǎn)染、共轉(zhuǎn)染、反向轉(zhuǎn)染、順序轉(zhuǎn)染或多重轉(zhuǎn)染……）、高通量篩選測定，并且在一些體內(nèi)模型中也顯示出良好的效率。它是如何工作的？用于脂轉(zhuǎn)染的脂質(zhì)試劑通常由合成的陽離...
i-MICST™技術(shù)（集成磁性免疫細胞分選和轉(zhuǎn)染/轉(zhuǎn)導(dǎo)）是一個新平臺，允許直接在磁性細胞純化柱上對細胞進行基因修飾。該技術(shù)將細胞分離和基因修飾結(jié)合在一個簡單、高效和可靠的集成系統(tǒng)中。專為i-MICST™技術(shù)而設(shè)計，病毒-MICST™試劑可以直接在磁性細胞純化柱上高效、特異性地轉(zhuǎn)導(dǎo)靶細胞。我們專為干細胞設(shè)計，開發(fā)了Viro-MICST干轉(zhuǎn)導(dǎo)增強劑。為什么使用Viro-MICST™？與常規(guī)轉(zhuǎn)導(dǎo)方法相比，Viro-MICST&trad...
肌苷單磷酸脫氫酶(IMPDH)(EC1.1.1.205)催化肌苷5'-單磷酸(IMP)轉(zhuǎn)化為黃苷5'-單磷酸(XMP)，這是鳥苷生物合成和鳥嘌呤庫的關(guān)鍵步驟核苷酸。在人類中，IMPDH是多種治療應(yīng)用（癌癥、免疫性疾病......）的經(jīng)過驗證的靶點。多種IMPDH抑制劑，包括重磅藥物（例如CellCept®），已顯示出其臨床功效。除了核苷（或NAD）類似物外，新的化學(xué)實體（NCE）已被確定為有效的IMPDH抑制劑，目前正在研究中。已知哺乳動物和細菌IMPDH具有顯著不同...
世界各地實驗室中常用的過程之一是電泳，但很多人仍然對該過程及其工作原理存有疑問。電泳是一個復(fù)雜的過程，但對于實驗室研究至關(guān)重要。電泳是一種實驗室技術(shù)，用于根據(jù)大小分離DNA、RNA和蛋白質(zhì)等分子。凝膠電泳通過施加電流促進帶電分子通過凝膠的遷移。當電流施加到凝膠上時，凝膠中的顆粒根據(jù)其電荷進行遷移。帶負電的顆粒從帶正電的顆粒移動到凝膠的另一端。較小的分子比較大的分子遷移速度更快，因此電泳可以根據(jù)大小分離分子。此過程在各種實驗室應(yīng)用中至關(guān)重要。它使研究人員能夠區(qū)分不同大小的DNA...
裂解緩沖液：為了準備在凝膠上運行的樣品，需要裂解細胞和組織以釋放感興趣的蛋白質(zhì)。這會溶解蛋白質(zhì)，使它們可以單獨遷移通過分離凝膠。我們使用RIPA緩沖液(beyotimeP0013B)來提取全細胞提取物和膜結(jié)合蛋白。蛋白酶和磷酸酶抑制劑：一旦發(fā)生裂解，蛋白水解、去磷酸化和變性就開始。如果樣品始終保存在冰上或4°C下，并且將適當?shù)囊种苿┬迈r添加到裂解緩沖液中，這些事件可以大大減慢。Pmsf是我們經(jīng)常使用的蛋白酶抑制劑。組織裂解液的制備用干凈的工具解剖感興趣的組織，最好在冰上，并盡...
抗體驗證是關(guān)鍵！以下是應(yīng)對您的抗體執(zhí)行的最基本的驗證步驟：肽產(chǎn)生的抗體-免疫原驗證將肽序列與UniProt數(shù)據(jù)庫進行比對，看看它是否僅與其目標具有同一性。肽序列與免疫原的蛋白質(zhì)序列之間的同一性為85%或更高的任何蛋白質(zhì)都可以被該抗體檢測到。不幸的是，確切的肽序列并不總是可用，但肽序列周圍的氨基酸范圍應(yīng)該是可用的。炸毀該地區(qū)也有幫助。所有Biorbyt的免疫原都會被傳輸回UniProt數(shù)據(jù)庫，以確保它們僅檢測到其設(shè)計針對的蛋白質(zhì)?？贵w的應(yīng)用驗證如果一種抗體據(jù)稱適用于蛋白質(zhì)印跡(...
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